檢驗科醫用顯微鏡的觀察方法介紹

檢驗科醫用顯微鏡的觀察方法多種多樣，以適應不同樣本和診斷需求。以下是一些常用的觀察方法：

一、明場觀察（Bright Field Observation）

明場觀察是*常見的顯微鏡觀察方式，也是一切光學顯微鏡的基礎。其主要特點是以染色的標本為觀察對象，利用透射率的變化為基礎。照明光直接通過聚光鏡射入樣品，并透過樣品進入物鏡*終被觀察到。多用于常規鏡檢、病理切片、染色標本的觀察。其優點包括視野亮度高、均勻、應用范圍廣泛、操作簡單；缺點則是對于透明的標本對比度較低。

二、暗場觀察（Dark Field Observation）

暗場觀察采用暗場照明，與明場觀察的照明方式不同。明場觀察的照明光線是直接進入物鏡的，而暗場觀察的照明光線是照亮被檢物品而不直接進入物鏡，觀察到的是被檢物品反射或衍射的光線。整個視場的背景是黑色的，被檢樣品呈現明亮的像，就像在夜空里看星星，因此也被稱為超顯微術。暗場觀察適合觀察微小粒子、細菌形態、細菌計數、透明標本等，能夠看到標本的細微結構。

三、相差觀察（Phase Contrast Observation）

相差觀察有效地利用光的干涉現象，將人眼不可分辨的相位差變為可分辨的振幅差，從而使原來透明的物體表現出明顯的明暗差異，對比度增強，這大大便利了活體細胞的觀察。該觀察方式主要應用在無色透明的活體標本結構，檢查鑒定活體細胞等。需要注意的是，在該模式下觀察光強要高、切片不能太厚（2~10um），蓋玻片、載片需符合標準，且其熒光效果不如明場物鏡。

四、熒光觀察（Fluorescence Observation）

熒光觀察不是通過普通光源的照明觀察標本，而是利用一定波長的光（通常是紫外光、藍紫光、藍光、綠光）激發顯微鏡下標本內的熒光物質，使之發射熒光。熒光顯微鏡的光源所起的作用不是直接照明，而是作為一種激發標本內熒光物質的能源。熒光觀察的優點包括高特異性（靶向標記）、對細胞刺激小（可活體染色）、能進行多重染色（共定位）。

五、微分干涉觀察（Differential Interference Contrast, DIC）

微分干涉觀察是在相差的基礎上演變而來的，但其物理原理與相差不同，技術設計比較復雜。DIC模式多用于觀察無色透明活體標本的形態輪廓、無色熒光標本、細微結構、運動情況觀測及顯微操作等。其優點在于使被檢物體產生三維立體感覺，觀察效果更直觀；無須特殊物鏡，與熒光觀察配合更好。但需要注意，雙折射物質不能達到DIC鏡檢效果，而且不能應用于塑料容器培養物的觀察。

六、偏光觀察（Polarized Light Observation）

偏光觀察是用于研究透明或不透明各向異性材料的一種顯微鏡觀察方法。具有雙折射的物質在偏光顯微鏡下能被看清。該方法的特點是將普通光變為偏振光進行鏡檢，以鑒別某一物質是單折射（各向同性）或雙折射（各向異性）。因此，偏光顯微鏡被廣泛應用在礦物和化學等領域，在生物學和植物學中也有應用。

七、霍夫曼調制相差觀察（Hoffmann Modulation Contrast, HMC）

霍夫曼調制相差觀察利用斜射光照射，將相位梯度轉變為光強度變化，這樣可以用來觀察未經染色的樣品和活細胞。它適用于相位物體、雙折射物體、染色試樣、柱狀物體以及具有表面和次表面特征的物體進行高分辨率顯微觀察，可對細胞組織、透明液態組織、培養皿中的培養組織進行動態顯微觀察及科研分析。

在實際操作中，檢驗科醫生或研究人員需要根據樣本的性質和診斷需求選擇合適的觀察方法，并嚴格按照顯微鏡的操作規程進行操作，以確保觀察結果的準確性和可靠性。